生物切片的制造方法

需要生物切片器。尽量切成透明的薄片，放在玻璃片上(植物滴水，动物滴生理盐水)，切片侧滴碘液，吸水纸从另一侧吸引染色。

需要生物切片器。尽量切成透明薄片，取一片放在玻璃上(如果是植物，加一滴水，动物滴生理盐水)，切片一侧滴碘液，吸水纸从另一侧吸引染色，然后用玻璃从一侧慢慢覆盖到另一侧。这样做好了，就可以拿到显微镜了。

具体情况如下。

1.用纱布擦拭玻片；

2.在干净的玻璃片上滴一滴清水(动物细胞用0.9%生理盐水)，水量不宜过多或过少；

3.从生物体上取材，放入水滴中；

4.撕裂的薄膜要平整，挑出的材料要涂几次，避免细胞重叠，看不清细胞机构；

5.用镊子夹住盖玻片，使其一侧先接触载玻片上的水滴(防止产生气泡)，然后慢慢地盖住要观察的材料；

6.在盖玻片的一侧滴染液；

7.用吸水纸吸收与滴染液相对的多余染液。

冷冻切片的原理及制造方法分析。

冷冻片是一种利用物理冷却方法冷冻新鲜组织标本，使其产生一定硬度进行切片的技术方法。与石蜡切片相比，由于冷冻切片不需要脱水和埋设，制片速度快，是临床医生在手术过程中提供病理诊断的好方法。此外，由于冷冻切片的标本是未固定的新鲜组织，冷冻切片也是脂肪染色、酶组织化学染色、某些免疫组织化学染色和原位分子杂交的理想制片方法。冷冻片的缺点是组织细胞的形状略逊于石蜡片。

第二，冷冻切片的制作方法。

采用氯乙烷喷射、二氧化碳喷射、半导体制冷等方法，可制成普通冷冻切片，用于术中病理诊断。冷冻切片机可制成适用于各种目地的冷冻切片，是目前常用的冷冻切片方法。

1.冷冻切片的技术操作方法。

(1)将恒冷箱冷冻切片机的速冻头和箱内温度调节到合适的切割温度，一般为18~125℃。

(2)在标本冷冻托架上涂一层一OCT的冷冻包埋剂，然后将取材后的新鲜标本放在标本冷冻托架上，用OCT覆盖标本。

(3)标本冷冻后，将标本托固定在切片机头部，调整头部位置，使其正好位于切片刀后面。

(4)用粗切削方法将标本粗切削到暴露标本的大平面，ELISA试剂盒用自动推进方法连续切削2~3刀，然后用毛笔清除机头、标本托和刀片上的组织碎屑。

(5)调整和确认切片厚度，一般为4~8um，染脂和神经组织应控制在12~25um。

(6)放下防卷板，使防卷板的位置与切片刀的刀刃完全平行，突出于刀刃。

(7)自动推进切片，良好的切片在防卷板下形成完全平坦的薄片，如果切片稍微弯曲，可以用小毛笔轻轻平坦切片。

(8)打开防卷板，用载玻片平滑地轻压切片，使其平滑地吸附在载玻片上。

第三，冷冻切片的染色。

切片后立即投入丙酮固定，一般固定1~2min即可染色，用于免疫组化染色的冷冻在切片稍干后立即投入冷甲醇固定10~15rmin，然后进行相应的组织化学染色程序。

一、冻片的HE染色程序。

(1)将切片固定在丙酮中1~2分钟。

二是水洗5s。

(3)的Harris苏木精染液染细胞核2min。

(4)水洗5秒。

在0.5%的盐酸乙醇液中分化1~3秒。

(6)水洗5秒。

(7)在0.5%~1%的伊红染液中胞质20~30s。

(8)水洗5秒。

(9)在95%乙醇I95%乙醇I、100%乙醇I、ELISA试剂盒100%乙醇I、中脱水各3~5s。

(10)甲苯二甲苯二甲苯二甲苯各5s透明。

(11)干燥组织周围的二甲苯在二甲苯干燥前滴下光学树脂胶片。